期刊简介
本刊是由中国同位素公司主办的医学刊物，按照普及与提高相结合，临床应用与基础研究兼顾的原则，集中刊登国内标记免疫分析（放射免疫分析、酶免疫分析、其他非同住素标记免疫分析、免疫荧光分析等）领域内的理论、应用及技术创新和改进方面的文章。
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首页>标记免疫分析与临床杂志
- 杂志名称：标记免疫分析与临床杂志
- 主管单位：中国核工业集团公司
- 主办单位：中国同辐股份有限公司
- 国际刊号：2-307
- 国内刊号：1006-1703
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：万方收录(中), 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中)
重组人瘦素表达及其免疫活性鉴定
王晓辉；颜光涛；薛辉；郝秀华；齐菲
关键词：瘦素, 克隆, 表达, 融合蛋白, 大肠杆菌
摘要：为探讨人瘦素(leptin)在大肠杆菌中重组表达的途径,本研究用PCR方法扩增人leptin的编码区(CDS),使产物与pGEM-T easy载体相连,转染DH5α.测序后,选出阳性克隆质粒扩增.将酶切后的leptin片段与pET-28a(+)载体连接,获得leptin的表达质粒.将重组表达质粒转入BL21(DE3),测序结果显示leptinCDS没有突变产生,用IPTG诱导人重组(rh)leptin蛋白表达.表达产物进行SDS-PAGE电泳及免疫学分析.结果显示,包涵体在22 kDa蛋白处有明显的新增蛋白带,其含量超过总蛋白的50%;经Western-blot证实为重组的人(rh)leptin.本实验表明:rh-leptin在BL21(DE3)/pET-28a(+)体系中能高效表达,表达产物具有免疫活性.
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