期刊简介
本刊是由中国同位素公司主办的医学刊物，按照普及与提高相结合，临床应用与基础研究兼顾的原则，集中刊登国内标记免疫分析（放射免疫分析、酶免疫分析、其他非同住素标记免疫分析、免疫荧光分析等）领域内的理论、应用及技术创新和改进方面的文章。
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首页>标记免疫分析与临床杂志
- 杂志名称：标记免疫分析与临床杂志
- 主管单位：中国核工业集团公司
- 主办单位：中国同辐股份有限公司
- 国际刊号：2-307
- 国内刊号：1006-1703
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：万方收录(中), 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中)
人干燥综合征A抗原克隆表达与重组蛋白及其临床应用研究
李倩；高扬；倪安平；李永哲；于孟学；刘音；朱立平；林嘉友；甘晓丹
关键词：人干燥综合征A抗原, cDNA克隆, 重组体, ELISA
摘要：克隆人干燥综合征A抗原基因(SSA-60kD),为SSA抗原的表达和使用重组抗原建立ELISA法用于自身抗体的临床检测.根据GenBank中检索到的人SSA-60kD cDNA序列,在5'和3'非编码区设计特异性引物,提取人源HeLa细胞总RNA作为模板,经RT-PCR扩增SSA-60kD抗原cDNA.PCR产物纯化后连接至载体PET-30a,导人大肠杆菌DH5,构建重组质粒PET-30a-sSA-60kD.对后者进行酶切鉴定、测序和分析.在大肠杆菌中表达,产生重组融合蛋白.RT-PCR扩增产物为1632bp.PET-30a-SSA-60kD经EcoR I和V双酶切证实含目的基因片段.序列分析提示与GenBank中一致.利用金属螯合亲和层析法和纯化,得到了高纯度的SSA-60kD重组蛋白.成功克隆人SSA-60kD基因,并构建PE-30a-ssA-60kD,建立了ELISA方法,检测了风湿病患者血清中抗SSA-60kD自身抗体.
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